Esta organización se creó durante el Tercer Encuentro de Lesbianas Feministas Latinoamericanas y del Caribe celebrado en Cabo Rojo, Puerto Rico en 1992. “Desde que comenzaron los trabajos en los diferentes talleres del Encuentro, afloraba la urgencia de discutir la experiencia de ser madres, y nuestra situación particular dentro de la comunidad gai-lésbica y la sociedad en general. Así fue que un grupo se citó a compartir sus inquietudes. A este improvisado taller compareció aproximadamente el 12% de las participantes del Encuentro.” (Madres Lesbianas, un poco de nuestra historia)
Luego del Encuentro, sintieron la necesidad de constituirse como grupo que integró madres biológicas y otras mujeres que laboraban juntas en la crianza de sus niñas y niños. Desarrollaron actividades para compartir “en familias”, integrarse a coaliciones dentro y fuera de Puerto Rico, participar en las Paradas de Orgullo Gay, y visibilizarse a través de entrevistas en radio, televisión y en revistas tanto gai-lésbicas como en los medios tradicionales de comunicación. Madres Lesbianas estuvo activa por doce años. (Entrevista a Sylvia Calzada, por Elizabeth Crespo Kebler y Ana Irma Rivera Lassén, San Juan, Puerto Rico, 19 de julio de 2017.)